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細胞學堂 | 如何選擇細胞因子

更新時間:2023-04-24  |  點擊率:2211


細胞因子是由免疫原、絲裂原或其他刺激劑誘導多種細胞合成并分泌產生的,具有廣泛生物學活性的低分子質量蛋白或多肽,用于細胞間信號傳導和相互作用。

本期細胞學堂將為大家介紹細胞因子的分類及選擇方法,供大家參考學習。


細胞因子的分類


細胞因子按照其功能可被分為白細胞介素(IL)、干擾素(IFN)、腫瘤壞死因子(TNF)、集落刺激因子(CSF)、趨化因子和生長因子等。細胞因子具有調節固有免疫、適應性免疫、血細胞生成、細胞生長分化以及損傷組織修復等多種生物學功能。眾多細胞因子在機體內相互促進或相互制約,形成極其復雜的細胞因子免疫調節網絡。

IL

IL是一類能夠雙向調節免疫系統的細胞因子家族,主要參與免疫細胞的分化和激活。IL可劃分為IL-1細胞因子家族、共γ鏈細胞因子家族、IL-10細胞因子家族、IL-12細胞因子家族等;

IFN

IFN是機體應對各種不同的刺激(包括病毒)時所產生的一類特殊的蛋白質或糖蛋白,分為IFN-α、IFN-β、IFN-γ 3類,具有調節先天免疫、活化抗病毒性質和抗增殖功能

TNF

TNF是一種促炎性細胞因子,分為TNF-α和TNF-β 2種,具有促炎作用,能夠誘導腫瘤細胞壞死,此外還參與發熱和炎癥的發生;

CSF

CSF主要包括粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(CM-CSF)、巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)和粒細胞集落刺激因子(G-CSF),可刺激造血祖細胞增殖和分化。CSF也是促炎細胞因子網絡的一部分,參與炎癥的發生和發展;

趨化因子

趨化因子是一類具有7~15ku的低分子質量的細胞因子大家族,根據其氨基端半胱氨酸排列基序可分為C-X-C基序(CXC)、C-C基序(CC)、C-X3-C基序(CX3C)、C基序(C)四個趨化因子亞族。趨化因子及其受體能夠控制所有免疫細胞的遷移和歸巢,并促進胚胎形成、先天和獲得性免疫系統的發育以及腫瘤轉移等

生長因子

生長因子是一類能夠影響多種細胞的生長、分化、凋亡過程及調節免疫的多肽類物質,其種類繁多,包括類胰島素生長因子(IGF)、表皮生長因子(EGF)和轉化生長因子-β(TGF-β)等。


細胞因子的選擇


在開始實驗前,可根據以下注意事項選擇細胞因子,保證實驗效果。

1

在選擇表達系統之前需要充分了解自己的研究目的,根據應用來選擇最合適的表達系統:

表達系

常用范圍

原核體系

動物免疫用抗原;蛋白功能研究;細胞體外增殖;藥物蛋白

哺乳動物細胞

抗體類藥物研究

酵母細胞

疫苗研究

昆蟲細胞

蛋白質晶體及晶體結構研究

2

細胞因子若作為動物免疫抗原進行檢測類抗體的研究,蛋白純度大于80%即可;若用于晶體及晶體結構研究,蛋白純度要大于95%;

3

多種不同種屬來源的細胞因子,例如人源、小鼠源、大鼠源等等,建議根據實驗需求選擇對應的種屬;

4

若需選擇不同種屬來源的細胞因子,則要判斷某種種屬的細胞因子是否對其他種屬的細胞有交叉反應活性。一般來說,不同種屬之間蛋白同源性(序列一致性)在80%以上的基本上可確定為有交叉活性。注意:

大多數人源細胞因子可作用于鼠源細胞因子;

具有種屬特異性的細胞因子,不能在不同種屬間互相使用,如GM-CSF;

若無種屬特異性,細胞因子可在高低等生物中通用,如EGF;

高度保守的細胞因子,在不同動物種屬細胞上均具有反應活性,如成纖維細胞生長因子(FGFs)。

參考文獻

[1] 王玉亮, 王峰, 耿潔. 細胞因子與細胞因子風暴[J]. 天津醫藥, 2020, 48(6):6.

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